Actividad 12: Hibridación con una sonda de ADN

hibrida del ADN

Empareja cada paso observado en el esquema superior de la hibridación del ADN, con el proceso correspondiente.

- Revelado en placa radiográfica e interpretación de los resultados.

- Digestión del ADN con enzimas de restricción tras conseguir extraer un ADN de alta molecularidad. Separación de los fragmentos obtenidos y desnaturalización de los fragmentos separados y cortados.
- Colocación de una membrana de celulosa o nylon sobre el cultivo

- Hibridación de la sonda marcada y desnaturalizada, con los fragmentos de ADN fijados a la membrana, y lavado de la membrana para eliminar el exceso de sonda o aquellas que hayan hibridado mal.
- ADN impreso
- Marcaje con la sonda de nucleótidos radioactivos
- Prehibridación con sondas de ADN inespecífico para bloquear los lugares de unión inespecíficos que pudiera haber en la membrana.
- Transferencia de las cadenas simples a la membrana con fijación de las cadenas simples por medio de calor (80ºC).